【洞察】RNA探針細(xì)分產(chǎn)品各有優(yōu)缺點(diǎn) 我國相關(guān)研究不斷深入
RNA探針采用示蹤物進(jìn)行標(biāo)記,通常采用放射性同位素、地高辛、生物素、熒光染料等,這些示蹤物具有自顯影或者發(fā)光效果,以達(dá)到高靈敏檢測效果。
RNA探針,是生物探針的一種,屬于核酸探針,是能與相對應(yīng)核酸序列進(jìn)行互補(bǔ)結(jié)合的一段核酸分子,根據(jù)來源來看,主要包括單鏈cDNA探針、cRNA探針、寡核苷酸探針三種。
RNA探針的核酸分子為單鏈,需經(jīng)過示蹤物標(biāo)記,然后與靶核酸序列進(jìn)行雜交,形成雙鏈,對標(biāo)記物進(jìn)行探測,可獲得樣品中是否含有目標(biāo)核酸序列,以及含量的多少與位置。RNA探針核酸分子的選擇需要關(guān)注核酸分子的特異性、制備與標(biāo)記難易程度、雜交穩(wěn)定性等,早期采用的RNA探針主要是細(xì)胞mRNA探針、病毒RNA探針,標(biāo)記難度較大,應(yīng)用受到限制。
根據(jù)新思界產(chǎn)業(yè)研究中心發(fā)布的《2024-2028年RNA探針行業(yè)深度市場調(diào)研及投資策略建議報告》顯示,目前常見的RNA探針細(xì)分產(chǎn)品中,單鏈cDNA探針,對相應(yīng)基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄,獲得mRNA,再經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA,制備過程較為復(fù)雜;cRNA探針,以cDNA為模板,經(jīng)過體外轉(zhuǎn)錄獲得cRNA,制備難度較大;寡核苷酸探針,體外人工合成的與目標(biāo)基因序列互補(bǔ)的單鏈核苷酸片段,對片段長度范圍要求較高,標(biāo)記物攜帶有限。這些不同類型的RNA探針產(chǎn)品各有優(yōu)缺點(diǎn)。
RNA探針采用示蹤物進(jìn)行標(biāo)記,通常采用放射性同位素、地高辛、生物素、熒光染料等,這些示蹤物具有自顯影或者發(fā)光效果,以達(dá)到高靈敏檢測效果。例如以地高辛標(biāo)記的RNA探針為例,可以利用瓊脂糖凝膠電泳檢測片段長度,利用斑點(diǎn)雜交實(shí)驗驗證探針靈敏度,雜交完成后標(biāo)記物檢測方便。
與DNA探針相比,RNA探針具有可改良雜交印跡、雜交反應(yīng)效率高的優(yōu)點(diǎn),但僅能夠在體外轉(zhuǎn)錄過程中進(jìn)行標(biāo)記,且不穩(wěn)定容易被降解。因此RNA探針一般不應(yīng)用在檢測領(lǐng)域,主要應(yīng)用于科研領(lǐng)域。RNA探針可以廣泛應(yīng)用在動物、植物、微生物、病毒等基因編輯研究領(lǐng)域,例如HIV病毒基因組DNA克隆研究方面。
新思界行業(yè)分析人士表示,在全球范圍內(nèi),RNA探針提供商主要有瑞士Roche、荷蘭Biolegio、英國Bioline、美國Sigma-Aldrich、美國Empire Genomics、美國Bio-Techne、美國Promega、中國臺灣Abnova Corporation等,主要集中在美國地區(qū),其次是歐洲地區(qū)。
我國科研實(shí)力不斷進(jìn)步,RNA探針作為重要工具,研究還在不斷深入。2024年3月,中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所研究團(tuán)隊,發(fā)展了能夠與RNA特異性可逆結(jié)合,在活細(xì)胞內(nèi)對細(xì)胞核核仁穩(wěn)定成像的“緩沖熒光探針”Nu-AN,實(shí)現(xiàn)了對核仁動態(tài)輪廓的成像。
原文標(biāo)題 : 【洞察】RNA探針細(xì)分產(chǎn)品各有優(yōu)缺點(diǎn) 我國相關(guān)研究不斷深入
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