前言

迄今為止，與傳統(tǒng)的抗癌治療策略相比，免疫治療被認(rèn)為是最有前景的全身性腫瘤治療方法，其中，單克隆抗體因其特異性靶向分子的能力，已成為癌癥治療中一種關(guān)鍵而有效的治療方式。然而，由于腫瘤復(fù)雜的疾病發(fā)病機(jī)制，針對單一靶點(diǎn)的單克隆抗體往往不足以表現(xiàn)出足夠的治療效果。因此，針對多個靶點(diǎn)的雙特異性抗體（bsAbs）應(yīng)運(yùn)而生。

與單特異性的單克隆抗體相比， bsAbs是一類可以介導(dǎo)新的作用機(jī)制的抗體。2014年，首個靶向CD19/CD3ε的雙特異性T細(xì)胞接合器（BiTE）blinatumomab被FDA批準(zhǔn)用于治療急性淋巴細(xì)胞白血�。ˋLL）。自那時起，bsAbs掀起了一陣開發(fā)熱潮。截至2020年底，有三種bsAbs（catumaxomab、blinatumomab和emicizumab）獲得批準(zhǔn)。尤其最近幾年，3年中新增了11種bsAbs獲得了監(jiān)管機(jī)構(gòu)的批準(zhǔn)，其中9種被批準(zhǔn)用于治療癌癥(amivantamab, tebentafusp,mosunetuzumab, cadonilimab, teclistamab, glofitamab, epcoritamab, talquetamab,elranatamab) ，2種用于非腫瘤適應(yīng)癥(faricimab, ozoralizumab) 。

值得注意的是，其中emicizumab和faricimab，已經(jīng)取得了轟動性的地位，顯示了這類新型療法的前景。在接下來的關(guān)鍵十年，bsAb有望在血液系統(tǒng)惡性腫瘤、實(shí)體瘤和非腫瘤適應(yīng)癥中獲得更多的批準(zhǔn)，使bsAbs成為治療藥物的重要組成部分。

bsAb的模式

抗體由四條多肽鏈組成，分子量較大的兩條鏈稱為重鏈(H鏈)，而分子量較小的兩條鏈稱為輕鏈(L鏈)。在單抗中，兩條H鏈和兩條L鏈的氨基酸組成完全相同，而雙特異性抗體的開發(fā)是通過共表達(dá)兩條不同的H鏈和兩條不同的L鏈。從10種可能的H2L2重組混合物中獲得功能性雙特異性抗體是雙特異性抗體開發(fā)的最初挑戰(zhàn)之一，這通常稱為鏈相關(guān)問題。 

在過去幾十年里，研究者們已經(jīng)開發(fā)了許多策略，以解決這一問題。由這些策略誘導(dǎo)的不同設(shè)計特征或功能特性可用于所產(chǎn)生的雙特異性抗體模式的分類。             

基于片段的模式（Fragment-based formats） 

基于片段的雙特異性抗體簡單地將多個抗體片段結(jié)合在一個分子中，不含F(xiàn)c區(qū)域（fragment crystallizable，可結(jié)晶片段，與抗原結(jié)合片段Fab相對），避免了鏈相關(guān)問題，優(yōu)勢是產(chǎn)量高、成本低；缺點(diǎn)是半衰期相對較短。此外，基于片段的雙特異性抗體可能會出現(xiàn)穩(wěn)定性和聚合問題。 

對稱模式（Symmetric formats） 

對稱模式的雙特異性抗體保留了Fc區(qū)域，更接近于天然抗體，但在大小和結(jié)構(gòu)上有所不同。這些差異可能對與天然抗體相關(guān)的有利特性(如穩(wěn)定性和溶解度)產(chǎn)生負(fù)面影響，從而可能損害這些雙特異性抗體的理化和/或藥代動力學(xué)特性。 

不對稱模式（Asymmetric formats） 

大多數(shù)不對稱模式的雙特異性抗體與天然抗體非常相似，被認(rèn)為具有最低免疫原性的潛力。不過，解決鏈相關(guān)問題可能涉及到的復(fù)雜工程可能會抵消一些不對稱模式雙特異性抗體的這一優(yōu)勢。

bsAb的作用機(jī)制

根據(jù)其功能機(jī)制，BsAb可分為4類：結(jié)合同一抗原的兩個表位、細(xì)胞-細(xì)胞接合器、雙功能調(diào)節(jié)劑和細(xì)胞治療中的BsAb。其中，T細(xì)胞接合器是臨床研究中應(yīng)用最廣泛的形式，已被證明能誘導(dǎo)腫瘤特異性免疫細(xì)胞激活。

結(jié)合同一抗原的兩個表位

人們已經(jīng)開發(fā)了同時針對同一靶抗原內(nèi)2個不同表位的雙副表位抗體。例如，靶向癌胚抗原（CEA）或VEGF2的bsAb被開發(fā)用于治療癌癥。人們還開發(fā)了幾種bsAb來中和病毒抗原，例如，針對HBV表面抗原和HIV-1包膜蛋白的bsAb顯示出針對同源抗原的中和活性。

細(xì)胞接合器

細(xì)胞接合器連接兩種不同類型的細(xì)胞，主要是腫瘤細(xì)胞和T/NK細(xì)胞，以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞溶解。細(xì)胞接合器由TAA靶向部分和效應(yīng)細(xì)胞識別部分組成，并進(jìn)一步分為T細(xì)胞接受器和NK細(xì)胞接受器。

T細(xì)胞接合器利用TAA和TCR成分（主要是CD3），它們連接腫瘤細(xì)胞和T細(xì)胞，繞過TCR-MHC-I相互作用。因此，無論抗原特異性如何，T細(xì)胞結(jié)合器都會觸發(fā)T細(xì)胞活化，產(chǎn)生包括穿孔素和顆粒酶在內(nèi)的細(xì)胞毒性分子，以殺傷腫瘤細(xì)胞。

BiTE是T細(xì)胞結(jié)合器的一種形式，通過靶向TAA和CD3的單鏈抗體將腫瘤細(xì)胞和T細(xì)胞結(jié)合，用于T細(xì)胞介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞殺傷。靶向CD19和CD3的blinatumomab是臨床上典型的BiTE，2014年，blinatumomab成為第一個被FDA批準(zhǔn)的BsAb，用于治療ALL患者，在隨后的幾年里，blinatumomab的治療范圍進(jìn)一步拓寬，2018年，F(xiàn)DA批準(zhǔn)其用于首次或第二次完全緩解后MRD≥0.1%的pre-B ALL患者群體的治療。目前，超過60例BiTE形式的雙抗正在進(jìn)行I/II期臨床試驗。

NK細(xì)胞接合器將CD16A+NK細(xì)胞重定向至腫瘤細(xì)胞，誘導(dǎo)NK細(xì)胞活化。與BiTE相比，NK細(xì)胞接受者表現(xiàn)出較少的不良反應(yīng)，如細(xì)胞因子釋放綜合征（CRS）和神經(jīng)毒性。多種細(xì)胞毒性受體可激活NK細(xì)胞：CD16（FcγRIII）、天然細(xì)胞毒性受體（NCR；NKp30、NKp44、NKp46）、C型凝集素樣受體NKG2D（CD314）和CD94/NKG2C。最近，抗CD30×CD16A的NK細(xì)胞接合器（AFM13）在AACR 2022的報告中展示了不俗的抗腫瘤效果。

雙功能調(diào)制劑

雙功能調(diào)節(jié)劑同時結(jié)合兩種不同的免疫共刺激或共抑制分子，誘導(dǎo)靶細(xì)胞的功能改變。大多數(shù)雙功能調(diào)節(jié)劑靶向PD-1/PD-L1軸和其他免疫抑制分子，如CTLA-4（CD152）、TIM-3、LAG-3或TIGIT。MEDI5752（PD-1×CTLA-4）抑制PD-1+激活的T細(xì)胞中CTLA-4的功能，誘導(dǎo)PD-1的快速內(nèi)化和降解。與PD-1和CTLA-4單抗聯(lián)合治療相比，MEDI5752的活性顯著增強(qiáng)。針對其他檢查點(diǎn)分子的雙功能性抑制劑，包括LAG-3和TIGIT，也正在開發(fā)中。

過繼細(xì)胞治療中的bsAbs

盡管CAR-T細(xì)胞療法在血液系統(tǒng)惡性腫瘤中顯示出療效，但也觀察到了副作用，包括CRS、神經(jīng)毒性和靶向非腫瘤效應(yīng)。為了將不良反應(yīng)降至最低，正在進(jìn)行用BsAbs體外激發(fā)T細(xì)胞的研究。與單獨(dú)的BsAb和T細(xì)胞輸注相比，在體外BsAb武裝的T細(xì)胞治療可誘導(dǎo)強(qiáng)烈的抗腫瘤反應(yīng)，有效滲透到腫瘤部位，并減少細(xì)胞因子的釋放，從而將系統(tǒng)不良反應(yīng)降至最低。

OKT3×hu3F8 BsAb武裝T細(xì)胞（GD2BATs）在體外誘導(dǎo)特異性殺傷GD2陽性神經(jīng)母細(xì)胞瘤和骨肉瘤細(xì)胞系。在GD2陽性腫瘤患者的I期試驗中，GD2BATs在一些患者中顯示出臨床反應(yīng)，且無明顯副作用。

bsAb的未來展望

在未來的十年里，預(yù)計還會批準(zhǔn)更多具有改變醫(yī)療實(shí)踐潛力的bsAbs。在腫瘤學(xué)中，靶向不同細(xì)胞表面受體的分化型雙RTK信號抑制劑的開發(fā)仍然是一個活躍和先進(jìn)的臨床研究領(lǐng)域。例如靶向EGFR/LGR5的 petosemtamab、靶向HER2/HER3的zenocutuzumab以及靶向HER2雙表位的zanidatamab，這幾個正在美國進(jìn)行審評中。這方面需要關(guān)注的另一個非常重要的領(lǐng)域是使用bsAbs產(chǎn)生的雙特異性抗體偶聯(lián)偶聯(lián)物（bsADC），一些bsADC正在后期臨床試驗中進(jìn)行研究，包括靶向HER2的zanidatamb zovodotin（ZW49）以及具有靶向c-MET雙表位的REGN5093。

開發(fā)用于治療不同血液系統(tǒng)惡性腫瘤的TCE仍將是雙抗治療的主要研究領(lǐng)域，因為這類療法已經(jīng)證明了其臨床益處。目前，基于不對稱1 + 1 形式的odronextamab（CD20/CD3ε）80和 linvoseltamab（BCMA/CD3ε）正在接受審評，可能會在2024年獲得批準(zhǔn)、其它各種TCE正在NHL、多發(fā)性骨髓瘤和AML等適應(yīng)癥中進(jìn)行后期臨床開發(fā)。重要的是，新出現(xiàn)的數(shù)據(jù)也支持了TCE未來也可能在實(shí)體瘤中獲得更的廣泛應(yīng)用。

bsAb另一個主要研究領(lǐng)域仍然是開發(fā)雙靶向免疫檢查點(diǎn)抑制劑，例如PD-1和CTLA-4或LAG-3（tebotelimab）。這些雙檢查點(diǎn)抑制劑中的目前正在進(jìn)行后期臨床試驗，結(jié)果將顯示，與PD-1/PD-L1單克隆抗體與CTLA-4或LAG-3的聯(lián)合用藥相比，它們在療效和安全性方面是否優(yōu)越。值得注意的是，雙靶向PD-1/VEGF抑制劑ivonescimab目前正在接受中國國家藥品監(jiān)督管理局的審評，用于治療NSCLC。

最后，鑒于bsAbs的多功能性和介導(dǎo)全新MOAs的潛力，bsAbs領(lǐng)域有望看到更多新興的方法和候選藥物進(jìn)入臨床，有望在未來幾年提供腫瘤學(xué)和非腫瘤學(xué)適應(yīng)癥的關(guān)鍵數(shù)據(jù)，包括在感染/病毒學(xué)、自身免疫、代謝、神經(jīng)病學(xué)和眼科的應(yīng)用。這些新概念包括包括：1）不同于TCE的效應(yīng)細(xì)胞接合器，例如髓系細(xì)胞、NK或γδ-T細(xì)胞， 2）前藥概念，以腫瘤或腫瘤微環(huán)境特異性原位激活的bsAbs， 3）聯(lián)合膜蛋白內(nèi)化和降解的PROTAC樣bsAb， 4）基于抗體的細(xì)胞因子模擬物，以觸發(fā)細(xì)胞因子受體，以及 5）將bsAbs遞送跨越屏障（如血腦屏障）的獨(dú)特解決方案，其可用于治療神經(jīng)退行性疾病和其他疾病。

參考文獻(xiàn)：

1.Development of Bispecific Antibody for CancerImmunotherapy: Focus on T Cell Engaging Antibody. Immune Netw. 2022 Feb; 22(1): e4.

2. Apivotal decade for bispecific antibodies?. MAbs. 2024 Jan-Dec;16(1):2321635.

       原文標(biāo)題 : 雙特異性抗體關(guān)鍵的十年